PCR産物純化試劑盒（目錄号：RTP2202）

試劑盒内容及保存：

儲存條件(jiàn)：

本試劑盒在室溫（15–25℃）幹燥條件(jiàn)下，可(kě)保存12個月；更長時間的保存可(kě)置于2–8℃。（注意：當低溫貯存時，使用前應先将試劑盒内的溶液在室溫中放(fàng)置一段時間，必要時可(kě)在37℃水浴中預熱(rè)10-20分(fēn)鍾，以平衡溶液溫度。）

産品簡介：

本試劑盒采用離(lí)心吸附柱結合獨特的緩沖液系統，從(cóng)酶切、PCR等反應溶液中純化DNA片段，同時除去(qù)蛋白(bái)質、無機(jī)鹽離(lí)子及寡核苷酸引物等雜質。使用本試劑盒可(kě)回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大(dà)于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率爲30－50 %）。

每個吸附柱每次最多可(kě)吸附的DNA量約爲10 μg。

使用本試劑盒回收的DNA可(kě)适用于各種常規操作(zuò)，包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。

産品特點：

1 結合液PB爲亮黃(huáng)色，便于觀察體(tǐ)系的pH是否合适。

2 操作(zuò)快(kuài)捷，單個樣品操作(zuò)少于10分(fēn)鍾。

操作(zuò)步驟：

如(rú)非指出，所有離(lí)心步驟均爲使用台式離(lí)心機(jī)在室溫下離(lí)心。

1 在PCR反應液中直接加入5倍體(tǐ)積的PB液，颠倒混勻後，全部加入到吸附柱CA2中，10,000g離(lí)心30-60秒，到掉收集管中的廢液，将吸附柱CA2重新放(fàng)入收集管中。

注：● 如(rú)果PCR反應體(tǐ)系使用了石蠟油，無需去(qù)除，但(dàn)要使用10倍體(tǐ)積的PB液。

● 如(rú)果反應體(tǐ)系小于50μl，用水補至50μl體(tǐ)系，再加入PB液。

● 如(rú)果體(tǐ)系體(tǐ)積大(dà)于700μl，請(qǐng)分(fēn)次上柱，保證全部溶液均加入到吸附柱中。

2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），10,000g離(lí)心30-60秒，倒掉廢液，将吸附柱重新放(fàng)入收集管中。

3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10,000g離(lí)心30-60秒，倒掉廢液。

4 将離(lí)心吸附柱CA2放(fàng)回收集管中，10,000g離(lí)心2分(fēn)鍾，盡量除去(qù)漂洗液。

注意：此步必不可(kě)少！如(rú)果漂洗液有殘留，将會影(yǐng)響回收效率和DNA質量，進而影(yǐng)響下遊實驗；離(lí)心後将吸附柱蓋子打開，室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾，這樣将有助于徹底揮發殘餘乙醇。

5 将吸附柱放(fàng)到一個幹淨離(lí)心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加适量洗脫緩沖液EB，室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾。10,000g離(lí)心2分(fēn)鍾收集DNA溶液。

注意：

● 可(kě)将洗脫緩沖液EB預熱(rè)到60-70℃後再加到吸附膜上，這樣可(kě)以提高洗脫效率。

● CA2柱的洗脫體(tǐ)積不應少于20 μl，體(tǐ)積過小将會降低回收效率。

● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大(dà)影(yǐng)響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5範圍内，pH值低于7.0會降低洗脫效率

6 DNA産物-20℃保存。