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EB染色液

● 産品簡介：

EB染色液是EB的水溶液，濃度爲10mg/ml。EB（溴化乙錠）能與核酸分(fēn)子特異結合，用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分(fēn)子。廣泛應用于核酸電泳前後的染色以及流式細胞儀的樣品染色處理(lǐ)等。溴化乙錠（Ethidium Bromide；C₂₁H₂0N₃Br；分(fēn)子量爲394.32）含有一個可(kě)以嵌入DNA 堿基的三環平面基團。它與DNA 的結合沒有堿基序列特異性。大(dà)約每2.5 個堿基插入一個溴化乙錠分(fēn)子。當染料分(fēn)子插入後，紫外激發後呈現熒光(guāng)，可(kě)以檢測到10ng 的DNA 條帶。

● 保存、運輸及效期：

常溫避光(guāng)保存；常溫運輸；有效期兩年(nián)。

● 注意事(shì)項：

    EB有一定毒性，使用時請(qǐng)使用一次性手套操作(zuò)，注意防護！

●  使用說(shuō)明：

使用前，先離(lí)心快(kuài)甩EB溶液至管底，以防開蓋後EB造成的污染。

1. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（預染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱(rè)至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大(dà)約50-60℃以下時，按照(zhào)稀釋10000倍加入10 mg/ml EB溶液，如(rú)100ml凝膠加入EB量爲10 μl；徹底搖勻後鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳，電泳結束後紫外觀察。

注：預染法，EB染色會出現陰陽膠現象，即随着電泳時間延長，較小的片段會染色不清楚。參見(jiàn)實驗示例。可(kě)以将凝膠用後染法染色即可(kě)看(kàn)到小片段條帶。

2. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（後染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱(rè)至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大(dà)約50-60℃以下時，不要加入EB溶液，直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳。

5. 電泳結束後将凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中（染色液配制：100ml 緩沖液中加入100-200 μl EB溶液，混勻）染色15-20分(fēn)鍾；TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分(fēn)鍾。

6. 紫外觀察結果。

●  實驗示例：