伊紅(hóng)染色液

Eosin Staining Solution

●     産品組成：

● 産品簡介：

伊紅(hóng)(Eosin)是一種化學合成的酸性染料，在水中解離(lí)成帶負電荷的陰離(lí)子，可(kě)以和蛋白(bái)質氨基上帶正電荷的陽離(lí)子結合，可(kě)以使細胞胞漿染成不同程度的紅(hóng)色或粉紅(hóng)色，而蘇木素染色液能将細胞核染成藍色，與紅(hóng)色胞漿形成鮮明對比，從(cóng)而使蘇木素伊紅(hóng)(HE)染色成爲病理(lǐ)組織切片中最廣泛使用的一種常規染色方法。

本染色液可(kě)以重複使用，直至認爲效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可(kě)以染色200個樣品。

● 貯存：

RT避光(guāng)保存，一年(nián)有效。

● 操作(zuò)步驟：

1.  需要用戶自(zì)己準備的試劑

a.  固定液： 4%多聚甲醛固定液。

b.  分(fēn)化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；

c.  如(rú)果需要脫水、透明和封片處理(lǐ)，還(hái)需自(zì)備二甲苯，和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇；

d.  70%乙醇。

2.  樣品處理(lǐ)

a.  對于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分(fēn)鍾。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分(fēn)鍾。

無水乙醇5分(fēn)鍾。

90%乙醇2分(fēn)鍾。

80%乙醇2分(fēn)鍾。

70%乙醇2分(fēn)鍾。

蒸餾水2分(fēn)鍾。

b.  對于冰凍切片：

固定液固定10分(fēn)鍾以上。

蒸餾水2分(fēn)鍾。

c.  對于培養細胞：

固定液固定10分(fēn)鍾以上。

蒸餾水洗滌2分(fēn)鍾。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分(fēn)鍾。

3.  伊紅(hóng)染色

對于上述處理(lǐ)好的樣品：

伊紅(hóng)染色液染色30秒-2分(fēn)鍾(可(kě)以根據染色結果和要求調整時間)。 此時，如(rú)果需要直接觀察，可(kě)以用70%乙醇洗滌2次。如(rú)需脫水、透明後封片按後續步驟進行，70%乙醇洗滌後仍可(kě)按照(zhào)後續步驟進行脫水、透明和封片處理(lǐ)。

注：如(rú)果用于免疫組化等染色後的複染，可(kě)以參考上述步驟在其它染色完成後直接進行伊紅(hóng)染色。

4.  脫水、透明、封片或進行其它染色

a.  脫水、透明、封片：

70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無水乙醇10秒。二甲苯透明5分(fēn)鍾。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分(fēn)鍾。

用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察，細胞漿呈粉紅(hóng)色或紅(hóng)色。

b.  進行其它染色：

如(rú)果進行免疫熒光(guāng)染色，或進行Hoechst等熒光(guāng)染料的染色，在伊紅(hóng)染色液染色後： 70%乙醇洗滌2次，每次2分(fēn)鍾。 PBS或生(shēng)理(lǐ)鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光(guāng)染料染色的溶液浸泡5分(fēn)鍾。 然後就(jiù)可(kě)以進行免疫熒光(guāng)染色或其它熒光(guāng)染料的染色了。如(rú)果免疫熒光(guāng)染色效果不佳，可(kě)能染料對抗體(tǐ)結合有影(yǐng)響，請(qǐng)單獨染色。