溶菌酶溶液（10mg/ml）

● 産品規格:

   10 ml

● 産品内容:

● 保存條件(jiàn)：

    未配制的溶菌酶幹粉和溶解液-20℃保存，有效期24個月；配制好的溶液-20℃貯存有效期12個月。

● 産品說(shuō)明:

     Lysozyme，中文名爲溶菌酶，EC Number:3.2.1.17，CAS: 12650-88-3，活性>20KU/mg，純化自(zì)蛋清(egg white)，不含DNase、RNase和Protease，可(kě)以用于以質粒抽提、蛋白(bái)純化等爲目的的細菌裂解。

● 溶液配制方法：

取10 ml溶解液加到溶菌酶幹粉中，徹底溶解，即配成10 ml（10mg/ml）的溶菌酶溶液，-20℃保存。

● 使用方法：

細菌裂解：

1. 細菌過夜培養菌液10 ml 12,000 rpm離(lí)心 5 min 後，棄上清，盡量棄除殘餘培養基，留取管底部菌體(tǐ)。

2. 加入1 ml細菌裂解液，50μl 10mg/ml 溶菌酶溶液，用吸頭吹打至無可(kě)見(jiàn)細胞團塊，重懸菌體(tǐ)。

   注：此步驟可(kě)加入蛋白(bái)酶抑制劑如(rú)PMSF，保護蛋白(bái)，抑制降解；如(rú)裂解液比較粘稠，可(kě)以加入DNaseI溶液，消化基因組DNA。

3. 37℃孵育20 min，期間輕彈離(lí)心管數次以加速裂解。

注：溶菌酶的用量和處理(lǐ)時間與處理(lǐ)的細菌種類密切相(xiàng)關，用戶可(kě)以根據細菌種類進行調節。如(rú)革蘭氏陽性菌應将處理(lǐ)時間延長到30-60分(fēn)鍾。

4. 裂解完成後 13,000rpm4℃離(lí)心5 min，将上清（上清中即爲可(kě)溶性蛋白(bái)）轉移至新的離(lí)心管中，直接進行下一步純化或檢測實驗。