蛋白(bái)酶抑制劑混合物(100×,通用型)
産品編号
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規格
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貯存
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運輸
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PC1930-01
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1 ml
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-20℃
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濕冰
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PC1930-02
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5×1 ml
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-20℃
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濕冰
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● 儲存條件(jiàn)
-20℃保存,有效期一年(nián)。
● 産品簡介
蛋白(bái)酶抑制劑混合物(通用型,
100×) (Protease inhibitor cocktail for general use, 100×)
是一種通用型用于細胞或組織蛋白(bái)提取等的蛋白(bái)酶抑制劑混合物(200mMAEBSF,
30μM Aprotinin, 1 mMBestatin,1.4mME64 and 1mMLeupeptin in DMSO),并提供獨立包裝的0.1MEDTA。EDTA爲單獨包裝,以便選擇性使用。如(rú)用于檢測金屬蛋白(bái)酶活性,則不宜添加EDTA。
細胞或組織提取物等樣品中含有許多内源性的蛋白(bái)酶、磷酸酶等,容易導緻提取物中的蛋白(bái)降解或去(qù)修飾,從(cóng)而影(yǐng)響後續的蛋白(bái)檢測。因此在提取物等樣品中添加适當的蛋白(bái)酶、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白(bái)降解和去(qù)修飾的有效方法。
本産品爲經優化和測試的用于常規細胞或組織蛋白(bái)提取等的蛋白(bái)酶抑制劑混合物,包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白(bái)酶抑制劑以及氨基肽酶抑制劑。
本産品使用便捷,通常以1:100的比例分(fēn)别把蛋白(bái)酶抑制劑混合物(通用型,
100×)和0.1MEDTA(100×)加入裂解液中,即可(kě)用于常規的細胞或組織蛋白(bái)的提取,并有效抑制蛋白(bái)降解。
本産品可(kě)以有效抑制常規細胞或組織提取物中的各種蛋白(bái)酶活性,如(rú)絲氨酸蛋白(bái)酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白(bái)酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白(bái)酶、金屬蛋白(bái)酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白(bái)酶不可(kě)逆抑制劑,其抑制常數與PMSF和DFP的抑制常數相(xiàng)似,可(kě)以有效抑制胰蛋白(bái)酶(trypsin)、糜蛋白(bái)酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放(fàng)酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白(bái)酶,作(zuò)爲PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩定性更好。Aprotinin是絲氨酸蛋白(bái)酶的競争性可(kě)逆抑制劑;Bestatin是氨基肽酶可(kě)逆抑制劑;E64是半胱氨酸蛋白(bái)酶不可(kě)逆抑制劑;Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白(bái)酶可(kě)逆抑制劑;EDTA作(zuò)爲螯合劑是金屬蛋白(bái)酶的可(kě)逆抑制劑。
一個包裝的本産品通常足夠用于100ml裂解液的配制。
● 使用方法:
1.
本蛋白(bái)酶抑制劑混合物爲100×的儲存液,使用時按照(zhào)1:100的比例加入到裂解液中(例如(rú),1ml裂解液中加入10μl蛋白(bái)酶抑制劑混合物),混勻後即可(kě)使用。含有蛋白(bái)酶抑制劑混合物的裂解液宜現用現配,不宜配制後凍存待後續使用。根據需要,0.1M的EDTA也按照(zhào)1:100的比例加入到裂解液中。
2.
待所需的抑制劑添加完畢混勻後,就(jiù)可(kě)以開始進行常規細胞或組織的裂解和蛋白(bái)提取。
提示:蛋白(bái)酶抑制劑混合物盡量避免反複凍融,第一次使用後,可(kě)按照(zhào)每次使用量分(fēn)裝凍存。