Anti-COX IV抗體(tǐ)（鼠單抗）

COX IV抗體(tǐ)用經過适當修飾的人(rén)工(gōng)合成COX IV一段多肽作(zuò)爲抗原制備而成的抗COX IV小鼠單克隆抗體(tǐ)。本抗體(tǐ)在Western blot或免疫染色時僅識别COX IV。COX IV抗體(tǐ)可(kě)用作(zuò)線粒體(tǐ)蛋白(bái)上樣量的内參。

真核細胞中的細胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase，簡稱COX)是一種異源寡聚酶，通常含有13個亞基，定位于線粒體(tǐ)内膜，是線粒體(tǐ)呼吸鏈的酶複合物，它可(kě)以從(cóng)每4個還(hái)原性的細胞色素C得(de)到一個電子，傳遞給一個氧分(fēn)子，最終把一個氧分(fēn)子轉變成兩個水分(fēn)子。在此過程中細胞色素C氧化酶會結合4個質子用于産生(shēng)2個水分(fēn)子，同時把4個質子轉移到膜的另外一側産生(shēng)質子梯度，即建立跨膜的電化學勢，随後ATP合成酶可(kě)以利于該電化學勢合成ATP。細胞色素C氧化酶中構成催化中心的3個最大(dà)的亞基由線粒體(tǐ)DNA編碼，其餘10個亞基包括COX IV由細胞核内的基因組DNA編碼。細胞色素C氧化酶活性缺陷和人(rén)類多種疾病相(xiàng)關。

本抗體(tǐ)如(rú)果用于常規的Western檢測，至少可(kě)以檢測20次。

● 貯存形式：

1 mg/ml抗體(tǐ)溶于PBS，50%甘油，pH7.2。

● 保存及運輸條件(jiàn)：

-20℃保存，一年(nián)有效；避免反複凍融；濕冰運輸。

● 使用說(shuō)明：

1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:1000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過夜。

2. 免疫熒光(guāng)（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。

● 實驗示例：

K562懸浮細胞膜蛋白(bái)檢測

樣品：TP爲RIPA提取總蛋白(bái)做對照(zhào)；CY爲膜蛋白(bái)提取上清-胞漿蛋白(bái)；M爲使用不同去(qù)垢劑提取的膜蛋白(bái)

電泳：4-18% RealPAGE PrecastGel，樣品使用5×速溶性上樣緩沖液配成0.5μg/μl，37度30min後上樣，上樣體(tǐ)積爲10μl和20μl，

轉膜：0.45μm PVDF膜，1×RealBlot濕轉 400mA 35min。

封閉：快(kuài)速封閉液 RT 10 min

一抗：ATPase兔單抗 1:5000 O/N；

GAPDH兔多抗 1:3000 O/N；

COX IV鼠單抗 1:5000 O/N。

二抗：羊抗鼠IgG-HRP（貨号：HGM1060） 1:5000 RT 60min；羊抗兔IgG-HRP（貨号：HGM1020） 1:5000 RT 60min；

檢測：RealECL發光(guāng)液（貨号：EC2520）自(zì)動曝光(guāng)1秒

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