紅(hóng)細胞裂解液

Red Blood Cell Lysis Solution

● 産品包裝：

● 産品簡介：

紅(hóng)細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱ACK Lysis Buffer，是一種用于從(cóng)人(rén)或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去(qù)除無細胞核紅(hóng)細胞的溶液。

本裂解液經過優化配方，在裂解紅(hóng)細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。本裂解液的主要有效成分(fēn)爲氯化铵。本裂解液不适用于有細胞核紅(hóng)細胞的裂解，例如(rú)鳥或禽類的紅(hóng)細胞。

本産品已經經過過濾處理(lǐ)，溶液爲澄清透明溶液。如(rú)果要使用該産品處理(lǐ)過的血液或組織細胞樣品用于後續的原代培養、細胞融合等細胞培養實驗，建議(yì)客戶将溶液經過0.22 μm濾膜抽濾後使用。如(rú)果使用該産品處理(lǐ)的樣品進行核酸或蛋白(bái)提取及常規分(fēn)析測試，可(kě)以直接使用該産品。

● 保存及運輸：

4℃保存，一年(nián)有效；常溫運輸。

● 使用說(shuō)明：

對于組織細胞樣品需要洗滌液的常規操作(zuò)步驟：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理(lǐ)，通過适當方法分(fēn)散成細胞懸液，離(lí)心棄上清。

2. 加入3-5倍細胞體(tǐ)積的紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分(fēn)鍾。例如(rú)細胞沉澱的體(tǐ)積爲1ml，則加入3-5ml的紅(hóng)細胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作(zuò)均可(kě)。

3. 400-500g常溫離(lí)心5分(fēn)鍾，棄紅(hóng)色上清。4℃離(lí)心效果更佳。

4. 如(rú)果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可(kě)以重複上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅(hóng)細胞不會影(yǐng)響後續的些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入适量PBS、HBSS、生(shēng)理(lǐ)鹽水或無血清培養液，重懸沉澱，400-500g常溫離(lí)心2-3分(fēn)鍾，棄上清。可(kě)再重複1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應至少爲細胞沉澱體(tǐ)積的5倍。4℃離(lí)心效果更佳。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可(kě)進行計(jì)數等後續實驗。

 對于組織細胞樣品無需洗滌的快(kuài)速操作(zuò)步驟：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理(lǐ)，通過适當方法分(fēn)散成細胞懸液，離(lí)心棄上清。

2. 對于0.2ml細胞沉澱加入1ml紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分(fēn)鍾。本步驟在室溫或4度操作(zuò)均可(kě)。

3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生(shēng)理(lǐ)鹽水或無血清培養液，混勻。

4. 400-500g常溫離(lí)心5分(fēn)鍾，棄紅(hóng)色上清。4℃離(lí)心效果更佳。

5. 如(rú)果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可(kě)以重複上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅(hóng)細胞不會影(yǐng)響後續的一些檢測。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可(kě)進行計(jì)數等後續實驗。

   說(shuō)明：對于常規步驟，多一步洗滌過程中的離(lí)心，但(dàn)可(kě)以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大(dà)體(tǐ)積的離(lí)心管。快(kuài)速步驟少了一次離(lí)心，但(dàn)洗滌效果略差一些，同時需要大(dà)體(tǐ)積的離(lí)心管。

對于血液樣品需要洗滌的常規操作(zuò)步驟：

1. 取新鮮抗凝血，400-500g離(lí)心5分(fēn)鍾，離(lí)心棄上清。

2. 加入6-10倍細胞體(tǐ)積的紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分(fēn)鍾。例如(rú)細胞沉澱的體(tǐ)積爲1ml，則加入6-10ml的紅(hóng)細胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作(zuò)均可(kě)。注意：對于鼠的血液，裂解1-2分(fēn)鍾已經足夠，對于人(rén)的外周血，宜延長裂解時間至4-5分(fēn)鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。

3. 400-500g常溫離(lí)心5分(fēn)鍾，棄紅(hóng)色上清。4℃離(lí)心效果更佳。

4. 如(rú)果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可(kě)以重複上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅(hóng)細胞不會影(yǐng)響後續的一些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入适量PBS、HBSS、生(shēng)理(lǐ)鹽水或無血清培養液，重懸沉澱，400-500g常溫離(lí)心2-3分(fēn)鍾，棄上清。可(kě)再重複1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應至少爲細胞沉澱體(tǐ)積的5倍。4℃離(lí)心效果更佳。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可(kě)進行計(jì)數等後續實驗。

   注意：對于微量或少量的血液樣品，可(kě)以在第一步中不進行離(lí)心棄上清的操作(zuò)，直接在第二步中加入10倍血液體(tǐ)積的紅(hóng)細胞裂解液，并在室溫或4℃裂解4-5分(fēn)鍾。對于鼠的血液，裂解4-5分(fēn)鍾已經足夠，對于人(rén)的外周血，宜延長裂解時間至10分(fēn)鍾，但(dàn)通常不宜超過15分(fēn)鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。後續步驟相(xiàng)同。

對于血液樣品無需洗滌的快(kuài)速操作(zuò)步驟：

1. 每1ml新鮮抗凝血中加入10ml紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解4-5分(fēn)鍾。本步驟在室溫或4度操作(zuò)均可(kě)。注意：對于鼠的血液，裂解4-5分(fēn)鍾已經足夠，對于人(rén)的外周血，宜延長裂解時間至10分(fēn)鍾，但(dàn)通常不宜超過15分(fēn)鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。

2. 加入20-30ml PBS、HBSS、生(shēng)理(lǐ)鹽水或無血清培養液，混勻。

3. 400-500g常溫離(lí)心5分(fēn)鍾，棄紅(hóng)色上清。4℃離(lí)心效果更佳。

4. 如(rú)果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可(kě)以重複上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅(hóng)細胞不會影(yǐng)響後續的一些檢測。

5. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可(kě)進行計(jì)數等後續實驗。

   說(shuō)明：對于常規步驟，多一步洗滌過程的離(lí)心，但(dàn)可(kě)以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大(dà)體(tǐ)積的離(lí)心管。快(kuài)速步驟少了一次離(lí)心，但(dàn)洗滌效果略差一些，同時需要大(dà)體(tǐ)積的離(lí)心管。