胰酶細胞消化液(含酚紅(hóng))
産品編号
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産品名稱
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包裝
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RT0220
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胰酶消化液(含酚紅(hóng))
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100ml
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 産品簡介:
胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶(Trypsin)和0.02%EDTA,不含Ca2+和Mg2+,含酚紅(hóng)。該消化液已用0.22μm濾膜過濾除菌,可(kě)以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。有EDTA的胰酶比不含EDTA的胰酶消化效果更好,但(dàn)制備原代細胞一般不能用含EDTA的胰酶(否則不容易貼壁),用于流式細胞分(fēn)析的也不能用含EDTA的胰酶(否則殘留EDTA會将後續緩沖液中的Ca離(lí)子螯合)。
本胰酶細胞消化液具有方便快(kuài)速的特點,通常室溫消化1分(fēn)鍾左右就(jiù)可(kě)以消化下大(dà)多數貼壁細胞。
● 保存條件(jiàn):
低溫運輸,-20℃保存,有效期一年(nián)。
注:由于低溫影(yǐng)響胰酶消化液的pH值,-20℃貯存下溶液有時會變成淡黃(huáng)色,4℃融化後會轉變爲紅(hóng)色,這種顔色的變化不會影(yǐng)響胰酶的消化能力。
● 注意事(shì)項:
① 在使用胰酶細胞消化液的過程中要特别注意避免消化液被細菌污染。
② 胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪闆後生(shēng)長狀況會較差。
● 使用說(shuō)明:
1. 貼壁細胞的消化:
a) 吸去(qù)培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去(qù)除殘餘的血清。
b) 加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可(kě),室溫放(fàng)置30秒至2分(fēn)鍾。
注:不同的細胞消化時間有所不同。
c) 顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形态發生(shēng)明顯的變化,或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可(kě)以被吹打下來(lái);此時吸除胰酶細胞消化液;加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可(kě)直接用于後續實驗。
d) 如(rú)果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。
e) 如(rú)果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分(fēn)直接從(cóng)培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離(lí)心1分(fēn)鍾,沉澱細胞,盡量去(qù)除胰酶細胞消化液後,加入含血清的完全培養液重新懸浮細胞,即可(kě)用于後續實驗。
2. 組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相(xiàng)差很大(dà),通常以消化後可(kě)以充分(fēn)打散組織爲宜。