快(kuài)速半幹轉轉印試劑盒
Rapid Semi-Dry Transfer Blot Kit Ver740158
貨号
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名稱
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規格
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RT5040
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快(kuài)速半幹轉轉印試劑盒
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20次
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● 産品組成:
貨号
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名稱
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規格
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貯存
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RT5030
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5×RealBlot快(kuài)速半幹轉轉膜緩沖液
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500 ml
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4℃
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SP1010
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半幹轉轉印濾布
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20張/包
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RT
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ML-NC-152045-5
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NC膜
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5張/包
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RT
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RTD6301
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麗春紅(hóng)染色液
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100 ml
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RT
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 産品簡介:
快(kuài)速半幹轉轉印試劑盒使用半幹轉法(Semi-dry blot)方法,配套快(kuài)速半幹轉儀器能在10-15分(fēn)鍾内高效快(kuài)速地将蛋白(bái)轉移到印迹膜(NC膜)上。
特點:
環境友好:快(kuài)速轉膜液不使用甲醇,減輕了對實驗者和環境的傷害。
兼容性好:快(kuài)速轉膜液能兼容Laemmli膠,預制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。
節省時間:快(kuài)速轉膜液能在10-15分(fēn)鍾内完成蛋白(bái)的轉印。
以每次轉印使用200 ml 1×RealBlot快(kuài)速半幹轉轉膜緩沖液計(jì)算,該産品可(kě)以至少使用20次。
● 貯存及運輸:
按照(zhào)标簽溫度貯存;有效期一年(nián);常溫運輸。
● 使用說(shuō)明:
1 按照(zhào)下表配制1×RealBlot快(kuài)速半幹轉轉膜緩沖液:
加入順序
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組份
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1×快(kuài)速轉膜液配制量 200ml
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1
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5×快(kuài)速轉膜液
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40 ml
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2
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超純水
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120 ml
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3
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無水乙醇
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40 ml
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注:按照(zhào)順序加入各種溶液。如(rú)果加入轉膜液後沒有用水沖洗稱量容器,加入乙醇會産生(shēng)沉澱。
2 将濾布浸泡在1×快(kuài)速轉膜液中,完全浸濕3-5分(fēn)鍾。
3 根據凝膠大(dà)小将NC膜裁剪到凝膠近似大(dà)小,完全浸泡在轉膜緩沖液中。
4 将凝膠在超純水中浸泡漂洗2分(fēn)鍾,去(qù)除膠表面的SDS。
5 按照(zhào)順序做好轉印三明治結構:
1 負極(陰極)
2一張四層濾布
3 凝膠
4 轉印膜
5一張四層濾布
6 正極(陽極)
6 用滾輪趕出氣泡。
7 半幹轉推薦使用恒流轉移:
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一塊小型膠(7.3×8.5 cm)
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兩塊小型膠(7.3×8.5 cm)或一塊中型膠(8.5×13.5 cm)
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1.5 mm厚度凝膠
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下列條件(jiàn)基礎上增加2分(fēn)鍾
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下列條件(jiàn)基礎上增加2分(fēn)鍾
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大(dà)于130 kD
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恒流1.3 A,15分(fēn)鍾
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恒流2.5 A,15分(fēn)鍾
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5-130 kD
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恒流1.3 A,10分(fēn)鍾
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恒流2.5 A,10分(fēn)鍾
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小于30 kD
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恒流1.3 A,7分(fēn)鍾
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恒流2.5 A,7分(fēn)鍾
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注:不同廠(chǎng)家半幹轉儀器設置可(kě)能有所不同,請(qǐng)根據廠(chǎng)家說(shuō)明書(shū)适當調整。
8 轉膜效率檢測:
轉膜結束後,用蒸餾水漂洗NC膜,适量麗春紅(hóng)染色液染色2-5分(fēn)鍾,檢測轉膜效率。