PCR反應試劑盒 ( 2000bp )
貨号：RTC3105
● 簡介：
本試劑盒包含完成PCR反應所需全部試劑，可(kě)進行PCR實驗的教學和科(kē)研。其中模闆爲質粒DNA；引物爲根據質粒DNA序列設計(jì)的上、下遊引物；2×Taq
PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優化劑以及穩定劑。使用時，隻需補加實驗所需的引物和模闆後即可(kě)進行PCR反應，可(kě)最大(dà)限度的減少人(rén)爲誤差，具有快(kuài)速簡便、穩定性好等優點。使用本試劑盒進行PCR反應後，PCR産物大(dà)小應爲2000bp。
● 貯存：-20℃。有效期一年(nián)。
● 包裝：20次
● 試劑盒組成：
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組成
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濃度
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體(tǐ)積
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模闆
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10
ng/μl
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30
μl
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上遊引物（2000
FW）
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10
μM
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30
μl
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下遊引物（2000
RV）
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10
μM
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30
μl
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2×Taq
PCR MasterMix(含染料)
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-
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2×500
μl
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去(qù)離(lí)子水
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-
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1
ml
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● 實驗步驟：
1.
冰浴中徹底融化模闆，引物和2×Taq
PCR MasterMix，混勻後快(kuài)甩離(lí)心将溶液收集到管底。
2.
按照(zhào)下表在0.2ml
PCR管中制備反應體(tǐ)系：
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50μl反應體(tǐ)系
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上遊引物（2000FW） 10μM
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1 μl
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下遊引物（2000RV） 10μM
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1 μl
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模闆
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1 μl
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2×Taq
PCR MasterMix
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25 μl
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水
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22 μl
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3.
快(kuài)甩離(lí)心将反應液收集到管底。
4.
PCR儀如(rú)果沒有熱(rè)蓋加熱(rè)的話(huà)，補加25μl礦物油。
5.
PCR儀上執行以下程序：
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步驟
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溫度
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時間
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循環數
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初始變性
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94℃
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5 min
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1
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變性
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94℃
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30 sec
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30
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退火(huǒ)
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54℃
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30 sec
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延伸
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72℃
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2 min
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最後延伸
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72℃
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5 min
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1
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6. 反應完成後，取5ml反應液，1％瓊脂糖凝膠電泳，觀察條帶情況。