PCR染料添加劑(10×)
● 儲存和運輸:-20℃保存;常溫運輸
● 貨号:RTC3106
● 産品包裝:
5×1.5 ml
● 産品簡介
PCR染料添加劑爲含有紅(hóng)色染料和助沉劑的混合物,按照(zhào)10倍體(tǐ)積稀釋于PCR反應體(tǐ)系中,PCR結束後可(kě)以直接上樣電泳,不用再與loading buffer混合,方便快(kuài)捷。特有的紅(hóng)色染料不會影(yǐng)響Taq酶活性,電泳時指示前沿爲紅(hóng)色。
● 反應舉例:
注意:以下舉例爲常規PCR反應系統,僅供參考。實際反應條件(jiàn)因模闆、引物等的結構不同而各異,需根據模闆、目的片段的大(dà)小、堿基序列和引物長短(duǎn)等具體(tǐ)情況,設定最佳反應條件(jiàn)。
以人(rén)基因組DNA爲模闆,擴增1 kb的片段
1. 反應體(tǐ)系的建立:50μl反應體(tǐ)系如(rú)下(可(kě)根據比例放(fàng)大(dà)或縮小反應體(tǐ)系):
Template
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<1mg
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Primer 1(10 mM)
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1 ml
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Primer 2(10 mM)
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1 ml
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10×Taq Buffer
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5 ml
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dNTP
Mixture(10 mM)
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1 ml
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Taq (5 U/ml)
PCR染料添加劑(10×)
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0.5 ml
5
μl
水至50μl
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2.
PCR反應循環的設置:
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃5 min
3.
結果檢測:反應結束後取5μl反應産物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
注:紅(hóng)色指示染料電泳中的遷移速度略快(kuài)于溴酚藍。