您好,歡迎光(guāng)臨中科(kē)瑞泰!

免費咨詢電話(huà):
400-699-0631

首頁 > 蛋白(bái)生(shēng)物學 > 蛋白(bái)電泳試劑盒 > Tris甘氨酸電泳

SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒

SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒

産品編号:RTD6116

産品規格:50次

數量
價格 ¥300

SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒(貨号:RTD6116)

産品組成:

貨号

名稱

規格

保存條件(jiàn)

AC2914-02

40%PAA(29:1)

100 ml

4

TS050-01

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠緩沖液 pH8.8

100 ml

4

TS030-01

4×Tris/SDS濃縮膠緩沖液 pH6.8

50 ml

4

AP020P

APS(幹粉)

0.5 g

RT

TA0761-01

TEMED

0.5ml

4,避光(guāng)

PL080

5×MonoColor蛋白(bái)上樣緩沖液(含還(hái)原劑)

1 ml

-20

TG120P

5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液(幹粉)

1 L

RT

說(shuō)明書(shū)

一份

産品簡介:

本公司提供的SDS-PAGE蛋白(bái)電泳試劑盒包含凝膠制備以及蛋白(bái)電泳所需的全部試劑。本試劑盒可(kě)配制至少50塊常規大(dà)小的PAGE膠。

使用說(shuō)明:

配制分(fēn)離(lí)膠(各試劑使用量請(qǐng)參考表二)

根據目的蛋白(bái)的分(fēn)子量大(dà)小選擇合适的凝膠濃度(表一),再按照(zhào)下面的分(fēn)離(lí)膠配方表(表二)配制SDS-PAGE的分(fēn)離(lí)膠(即下層膠)。

表一 不同濃度的SDS-PAGE分(fēn)離(lí)膠的最佳分(fēn)離(lí)範圍:

SDS-PAGE分(fēn)離(lí)膠濃度

最佳分(fēn)離(lí)範圍

6%

50-150kD

8%

30-90kD

10%

20-80kD

12%

12-60kD

15%

10-40kD

配制分(fēn)離(lí)膠前,根據以下配方準備10% APS:

10% APS配制-5 ml将0.5 gAPS幹粉溶于5 ml滅菌水中,徹底溶解後分(fēn)裝,1 ml/支,-20℃備存,每次取一管使用。10% APS應盡量減少室溫存放(fàng)時間,以防失效。10%APS在4℃有效期爲一周,-20℃有效期6個月。若發現凝膠聚合時間延長,應考慮更換使用-20度保存的10%APS。

制備分(fēn)離(lí)膠步驟:

1.參照(zhào)凝膠模具說(shuō)明書(shū),裝配好凝膠模具。

2.按照(zhào)表二将不同體(tǐ)積的成分(fēn)在小燒杯或試管中混合;加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免産生(shēng)氣泡。

3.在凝膠模具中灌入适量分(fēn)離(lí)膠溶液(對于mini-gel,凝膠液加至約距前玻璃闆頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可(kě)),然後在分(fēn)離(lí)膠溶液上輕輕覆蓋一層1-5 cm的水層,使凝膠表面保持平整。

4.靜(jìng)置30-60分(fēn)鍾,待分(fēn)離(lí)膠和水層之間出現一個清晰的界面後,說(shuō)明凝膠已聚合

表二 SDS-PAGE分(fēn)離(lí)膠配方表

組份

不同凝膠體(tǐ)積對應各組份的取樣量(ml

6                                   5ml           10ml          15ml           20ml                          

H2O

3

6

9

12

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠buffer pH8.8

1.25

2.5

3.75

5

40 PAA29:1

0.75

1.5

2.25

3

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10 APS

0.05

0.1

0.15

0.2

8                                   5ml           10ml          15ml           20ml                          

H2O

2.7

5.4

8.1

10.8

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠buffer pH8.8

1.25

2.5

3.75

5

40 PAA29:1

1

2

3

4

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10 APS

0.05

0.1

0.15

0.2

10                                 5ml           10ml          15ml           20ml                          

H2O

2.45

4.9

7.35

9.8

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠buffer pH8.8

1.25

2.5

3.75

5

40 PAA29:1

1.25

2.5

3.75

5

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10 APS

0.05

0.1

0.15

0.2

12                                 5ml           10ml          15ml           20ml                          

H2O

2.2

4.4

6.6

8.8

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠buffer pH8.8

1.25

2.5

3.75

5

40 PAA29:1

1.5

3

4.5

6

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10 APS

0.05

0.1

0.15

0.2

15                                 5ml           10ml          15ml           20ml                          

H2O

1.825

3.65

5.475

7.3

4×Tris/SDS分(fēn)離(lí)膠buffer pH8.8

1.25

2.5

3.75

5

40 PAA29:1

1.875

3.75

5.625

7.

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10 APS

0.05

0.1

0.15

0.2

濃縮膠制備:

1.去(qù)除覆蓋在分(fēn)離(lí)膠上的水層。

2.按照(zhào)表三将不同體(tǐ)積成分(fēn)在一個小燒杯或試管中混合;加入10%過硫酸铵和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免産生(shēng)氣泡。

3.将濃縮膠溶液加至分(fēn)離(lí)膠的上面,直至凝膠溶液到達前玻璃闆的頂端。

4.将梳子插入凝膠内,避免産生(shēng)氣泡。

5.靜(jìng)置30-60分(fēn)鍾,等待濃縮膠聚合。

表三 SDS-PAGE濃縮膠(4%)配方表

組份

不同凝膠體(tǐ)積對應各組份的取樣量(ml

2 ml

4 ml

5 ml

10 ml

H2O

1.3

2.6

3.25

6.5

4×Tris/SDS濃縮膠buffer pH6.8

0.5

1

1.25

2.5

40 PAA29:1

0.2

0.4

0.5

1

TEMED

0.002

0.004

0.005

0.01

10 APS

0.02

0.04

0.05

0.1

電泳:

凝膠凝固好後,根據以下配方準備電泳緩沖液。

5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液幹粉全部倒入1L燒杯中,加入約900 ml水徹底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液(此溶液不用調節pH值)。用前再稀釋5倍即配成1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液。

在電泳槽的内槽内加入1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液(讓電泳緩沖液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,随後在電泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液。上樣,電泳,一般是濃縮膠80V,分(fēn)離(lí)膠120V恒壓,等指示前沿溴酚蘭電泳到分(fēn)離(lí)膠下緣後,結束電泳,染色或者進行下一步實驗。

下一步實驗。

引用RTD6116 SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒發表文章(zhāng)

1. [2015 IF=1.15] Metal-Chelate Affinity Precipitation with Thermo-Responsive Polymer for Purification of ε-Poly-L-Lysine.

Product: RTD61116 SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒

Author: Sipeng Li, Zhaoyang Ding, Jifu Liu, Xuejun Cao

Journal: Appl Biochem Biotechnol. 183, 4, 1254-1264,2017

InstitutionDepartment of Bioengineering, East China University of Science and Technology

Paper linkhttps://link.springer.com/article/10.1007/s12010-017-2495-3

 

2. [2013 IF=5.48] Rapid Allergen Inactivation Using Atmospheric Pressure Cold Plasma.

Product: RTD61116 SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒

Author: Yan Wu,Yongdong Liang,Kai Wei,Wei Li,Maosheng Yao,Jue Zhang

Journal: Environmental Science & Technology 48 (5), 2901–2909,2014

Institution Peking University

Paper linkhttps://www.pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/es5003988

 

3. [2013 IF=3.95] MS2 Virus Inactivation by Atmospheric Pressure Cold Plasma Using Different Gas Carriers and Power Levels.

Product: RTD61116 SDS-PAGE凝膠快(kuài)速制備及電泳試劑盒

Author: Yan Wu1, Yongdong Liang2, Kai Wei, Wei Li, Maosheng Yao, Jue Zhang, Sergey A. Grinshpun.

Journal: Appl. Environ. Microbiol 2015 Feb;81(3):996-1002

InstitutionPeking University

Paper linkhttps://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25416775/

 


 
隻有購(gòu)買過該商品的用戶才能進行評價。[發表評價]