考馬斯亮藍染色液(常規法)

● 儲存條件(jiàn)

常溫保存，開封後一年(nián)有效。

● 産品簡介

考馬斯亮藍染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍G-250爲主要成分(fēn)，采用新配方配置而成。可(kě)用于SDS-PAGE或非變性PAGE膠（native gel）的染色。采用常規染色方法需至少1小時可(kě)以完成染色；采用快(kuài)速染色方法數分(fēn)鍾即可(kě)完成染色。本染色液經過改良，不含有毒的甲醇，但(dàn)含有刺激性氣味的乙酸。

● 使用說(shuō)明：

一.  常規染色脫色方法：

1.  電泳結束後，取凝膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中，确保染色液可(kě)以充分(fēn)覆蓋凝膠。

2.  置于水平搖床或側擺搖床上緩慢(màn)搖動，室溫染色1小時或更長時間。

    注：具體(tǐ)的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時間宜适當延長。凝膠較薄，溫度較高，則染色時間可(kě)以适當縮短(duǎn)。通常染色至凝膠的顔色和染色液的顔色非常接近，在染色液中幾乎看(kàn)不清凝膠時，可(kě)以認爲已染色充分(fēn)。染色2-4個小時或更長時間不會對最終的染色效果産生(shēng)負面影(yǐng)響。

3.  倒出染色液。染色液可(kě)以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液，确保脫色液可(kě)以充分(fēn)覆蓋凝膠。

    注：脫色液可(kě)以使用考馬斯亮藍脫色液(RTD6204)；如(rú)果希望自(zì)行配制，推薦的脫色液配方爲：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。

5.  置于水平搖床或側擺搖床上緩慢(màn)搖動，室溫脫色4-24小時。期間更換脫色液2-4次，直至藍色背景基本上全部被脫去(qù)，并且蛋白(bái)條帶染色效果達到預期。通常蛋白(bái)條帶在脫色1-2小時後即可(kě)出現。

注：脫色期間可(kě)以在脫色液中加入一片吸水紙，可(kě)以使部分(fēn)染料吸附在吸水紙上，加快(kuài)脫色。脫色時間過長也會導緻蛋白(bái)條帶的顔色變淺。

6． 完成脫色後，可(kě)以把凝膠保存在水中，用于後續的拍(pāi)照(zhào)等。保存在水中的凝膠會發生(shēng)溶漲。如(rú)需避免溶漲，可(kě)以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可(kě)以制備幹膠。

二.  快(kuài)速染色脫色方法：

1.  電泳結束後，取膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中，微波爐加熱(rè)至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱(rè)。通常對于膠濃度大(dà)于10％的膠比較堅韌，在發生(shēng)煮沸時不易破損；對于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現膠碎裂的情況。

2.  随後在染色液溫度較高的情況下，在室溫搖床上搖動5-10分(fēn)鍾。

3.  倒出染色液。染色液可(kě)以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液，确保染色液可(kě)以充分(fēn)覆蓋凝膠。

   注：脫色液可(kě)以使用考馬斯亮藍染色脫色液(RTD6204)；如(rú)果希望自(zì)行配制，推薦的脫色液配方爲：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。

5.  微波爐加熱(rè)至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱(rè)。

6.  随後在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動5-10分(fēn)鍾。此時通常可(kě)以觀察到比較清楚的蛋白(bái)條帶。

7.  更換新鮮的脫色液，重複步驟5和步驟6，直至藍色背景基本上全部被脫去(qù)，蛋白(bái)條帶染色效果達到預期。

8.  完成脫色後，可(kě)以把凝膠保存在水中，用于後續的拍(pāi)照(zhào)等。保存在水中的凝膠會發生(shēng)溶漲。如(rú)需避免溶漲，可(kě)以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可(kě)以制備幹膠。