快(kuài)速蛋白(bái)鋅染試劑盒

● 産品組成：                                                        Ver.720359

● 産品簡介：                                                   

本試劑采用以鋅離(lí)子爲基礎的負染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE電泳凝膠染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，實驗方便快(kuài)速，可(kě)以在30 min左右完成，最低能夠檢測出2 ng的蛋白(bái)條帶，該方法不對蛋白(bái)質産生(shēng)修飾作(zuò)用，而且經過脫色液處理(lǐ)後，可(kě)以用于電洗脫或采用PAGE膠蛋白(bái)微量回收試劑盒（貨号：RTD8108）進行膠回收，以便進行質譜和測序分(fēn)析等，也可(kě)以用于電轉移或用其他(tā)染色方法（銀染或考染）對膠重新染色。

按照(zhào)每次使用50 ml1×即用型染色液計(jì)算，本産品可(kě)以染色 8-10塊mini-PAGE（8×10cm）膠。

● 儲存條件(jiàn)

按照(zhào)标簽溫度貯存，常溫運輸。開封後一年(nián)有效。

● 凝膠染色的操作(zuò)步驟：

以下步驟以一塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作(zuò)爲例。

一. 漂洗：

取出電泳後的 PAGE 凝膠，用超純水漂洗兩次，每次1分(fēn)鍾。

二. 染色：

2.1 準備1×即用型染色液：

2.1凝膠染色：

凝膠中加入50 ml 1×即用型染色液，常溫搖床慢(màn)搖10分(fēn)鍾。

注：增強液(100×)在低溫條件(jiàn)下會産生(shēng)白(bái)色沉澱，請(qǐng)在使用前60℃水浴中加熱(rè)，震蕩至完全溶解後使用。

三. 漂洗：

棄染色液，用超純水漂洗凝膠兩次，每次1分(fēn)鍾，至泡沫完全清除幹淨。

四. 顯色：

4.1 準備工(gōng)作(zuò)：将顯色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型顯色液。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型顯色液中，搖床慢(màn)搖30-60秒。觀察結果：在黑(hēi)色背景下，可(kě)見(jiàn)光(guāng)觀察，蛋白(bái)條帶爲棕褐色，無蛋白(bái)區域爲類白(bái)色；可(kě)見(jiàn)光(guāng)燈箱觀察（凝膠底部打光(guāng)），蛋白(bái)質條帶反顯白(bái)色，無蛋白(bái)的膠區則爲白(bái)色。

五. 漂洗：

棄顯影(yǐng)液，超純水洗滌凝膠2次，每次搖床慢(màn)搖1分(fēn)鍾。

注：凝膠可(kě)以在水中保存1-2周。

六. 脫色：

6.1 準備工(gōng)作(zuò)：将脫色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型脫色液。

6.2 如(rú)需要進行蛋白(bái)切膠回收，将所需的蛋白(bái)質條帶切下，用超純水漂洗切下的凝膠一次；如(rú)凝膠需要考染，銀染或轉膜實驗，直接用超純水漂洗整個凝膠一次。

6.3 棄水，凝膠中加入适量1×即用型脫色液覆蓋凝膠，搖床慢(màn)搖5分(fēn)鍾，倒掉脫色液；

6.4 重複脫色步驟2次。脫色完全的标志是白(bái)色凝膠完全脫色爲無色透明。

6.5 超純水漂洗凝膠兩次，進行後續實驗操作(zuò)。

●  實驗示例：

             4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝膠顯影(yǐng)後(脫色前)蛋白(bái)條帶在黑(hēi)色背景下爲棕褐色
可(kě)見(jiàn)光(guāng)燈箱觀察（凝膠底部打光(guāng)），蛋白(bái)質條帶反顯白(bái)色