印迹膜可(kě)逆染色試劑盒
Blot Membrane Reversible Stain Kit
産品編号
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産品名稱
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包裝
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RTD6302
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印迹膜可(kě)逆染色試劑盒
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10次
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● 産品簡介:
印迹膜可(kě)逆染色試劑盒使用獨特的染料,能用來(lái)檢測印迹膜(NC膜或PVDF膜)上蛋白(bái)質的轉移效率,能夠簡單、快(kuài)速地在印迹膜上得(de)到藍色條帶,易于拍(pāi)照(zhào)保存實驗結果。染色液對印迹膜上的蛋白(bái)質有很高的親和力,但(dàn)不永久結合,染料可(kě)以在5-15分(fēn)鍾内使用洗脫液清洗掉,不影(yǐng)響後續的Western blot檢測。
該産品可(kě)以解決其他(tā)印迹膜染色方法的缺點。例如(rú),麗春紅(hóng)染色靈敏度低(特别是PVDF膜,蛋白(bái)的檢測下限是250 ng),膜上紅(hóng)色容易褪色,紅(hóng)色條帶不易拍(pāi)照(zhào)等。經典的考馬斯染料是雖具有靈敏度高的優點,但(dàn)它永久與蛋白(bái)質結合,不易洗脫掉染料,幹擾後續的Western blotting實驗。
該試劑盒中的染色液對印迹膜上蛋白(bái)檢測具有較高的靈敏度,NC膜可(kě)以檢測5-10 ng蛋白(bái),PVDF膜可(kě)以檢測10-20 ng蛋白(bái),靈敏度是麗春紅(hóng)染色的10倍。
該試劑盒,以每次使用10 ml染色液,20 ml脫色液計(jì)算,可(kě)以使用10次。
● 産品組成:
産品編号
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産品名稱
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包裝
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RTD6302-01
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染色液
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100 ml
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RTD6302-02
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脫色液
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200 ml
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 保存、運輸及效期:
常溫保存;常溫運輸;有效期一年(nián)。
● 使用說(shuō)明:
一 印迹膜染色:
1.1 電泳結束後,将膜用超純水震蕩漂洗3次,每次2分(fēn)鍾,徹底去(qù)除膜表面的任何殘餘物質,這些物質可(kě)能會影(yǐng)響染料和蛋白(bái)的結合。
1.2 将膜浸泡到适量染色液中,搖動1-5分(fēn)鍾,此時可(kě)以明顯看(kàn)到藍色條帶。
1.3 用蒸餾水漂洗膜1-2次,每次1分(fēn)鍾,直到條帶清晰可(kě)見(jiàn)爲止。
1.4 觀察保存染色結果。
二 脫色:
2.1 将膜浸泡于适量脫色液中,搖動5-10分(fēn)鍾,直至膜上看(kàn)不到藍色條帶。
2.2 用蒸餾水漂洗膜1-2次,每次1分(fēn)鍾
2.3
進行後續封閉步驟。
三 實驗示例:
NC膜染色和脫色結果
左 0.22μm NC膜,半幹轉轉膜;中 染色液染色5min;右 脫色液脫色5min
印迹膜可(kě)逆染色試劑盒(RTD6302) 麗春紅(hóng)染色液(RTD6301)
電泳:4-20%RealPAGE Tris-Glycine預制膠(RTD6117-0420)
1×TGS 200V 50min
轉膜:0.22μm NC膜,半幹轉,5×RealBlot快(kuài)速半幹轉轉膜緩沖液(RT5030 )
恒流 13.A 10min
左:染色液(RTD6302-01) 常溫染色3min
右:麗春紅(hóng)染色液(RTD6301),常溫染色3min