細菌蛋白(bái)提取試劑盒（100次）  貨号：RTD8101

● 産品組份及規格

● 産品簡介

細菌蛋白(bái)提取試劑盒使用溫和的非離(lí)子型去(qù)污劑，适用于大(dà)腸杆菌表達的重組蛋白(bái)提取。提取過程中不需進行超聲破碎等複雜的操作(zuò)步驟，有效避免了外源蛋白(bái)的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白(bái)酶抑制劑PMSF，可(kě)提高蛋白(bái)提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現象，有效避免蛋白(bái)降解。所提取的蛋白(bái)保持了生(shēng)物學活性，可(kě)進行IP、Western blot實驗；提取體(tǐ)系中不含EDTA，可(kě)直接通過Ni-NTA 等純化填料進行蛋白(bái)純化。該試劑盒既可(kě)适用于小量蛋白(bái)表達檢測，也适用于大(dà)量蛋白(bái)的表達純化試驗。

每次提取使用1ml 緩沖液計(jì)算，該試劑盒可(kě)以使用100次。

●    貯存條件(jiàn)：

試劑組份按照(zhào)溫度貯存，可(kě)保存 12個月。

●    使用方法：

1. 8,000 rpm常溫離(lí)心 3 min 後，棄上清，盡量棄除殘餘培養基，留取管底部菌體(tǐ)。

2. 即用型提取緩沖液配制：每ml 提取緩沖液中加入10 μl PMSF，10 μl 溶菌酶，1 μl DNase I，混勻後4℃貯存備用。注：該緩沖液現用現配，不建議(yì)貯存。

3. 按照(zhào)原菌液1/2-1/5體(tǐ)積加入即用型提取緩沖液，即2-5 ml菌液收集的菌體(tǐ)加入1 ml 提取緩沖液，用吸頭吹打至無可(kě)見(jiàn)細胞團塊，重懸菌體(tǐ)。

4. 20-37℃孵育 15-20 min，期間輕彈離(lí)心管數次以加速裂解。

注：若蛋白(bái)表達量較低，建議(yì)結合超聲破碎，置冰上後，采用300w，10s 超聲/10s 間隔，超聲20min，至菌液變清亮。

5. 裂解完成後 13,000rpm4℃離(lí)心5 min，将上清（上清中即爲可(kě)溶性蛋白(bái)）轉移至新的離(lí)心管中，直接進行下一步純化或檢測實驗。

6. 蛋白(bái)提取物分(fēn)裝後建議(yì)-80℃保存。

實驗示例：