您好,歡迎光(guāng)臨中科(kē)瑞泰!

免費咨詢電話(huà):
400-699-0631

首頁 > 核酸生(shēng)物學 > PCR相(xiàng)關 > PCR MasterMix

2×pfu PCR MasterMix 不含染料

2×pfu PCR MasterMix 不含染料

産品編号:RTH3103-03

産品規格:5×500μl

相(xiàng)關規格:
數量
價格 ¥400

2×pfu PCR MasterMix

 産品包裝:

 

 

目錄号

包裝

2×pfu PCR MasterMix(不含染料)

RTH3103-02

500μl

RTH3103-03

5×500μl

2×pfu PCR MasterMix(含染料)

RTH3104-02

500μl

RTH3104-03

5×500μl

注:以50μl PCR反應體(tǐ)系爲例,每次使用25μl 2×MasterMix500μl可(kě)做20 50μl PCR反應。

 儲存條件(jiàn): -20℃可(kě)長期保存;4℃穩定貯存3個月。經常使用時,一旦融化後請(qǐng)4℃貯存,盡量避免反複凍融。

 産品簡介:

本産品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優化劑以及穩定劑,濃度爲2×。使用時,隻需補加實驗所需的引物和模闆後即可(kě)進行PCR反應,可(kě)最大(dà)限度的減少人(rén)爲誤差,具有快(kuài)速簡便、穩定性好等優點。用于高保真的DNA片段的擴增。使用該産品得(de)到的PCR擴增産物爲平滑末端,不可(kě)以直接用于TA克隆,要通過平滑末端克隆法進行克隆。

 質量控制:

以λ DNA爲模闆,可(kě)以很好擴增5kb的DNA片段;以水稻基因組爲模闆,可(kě)以很好擴增3.2kb的DNA片段。

●  使用說(shuō)明:

1. 冰浴中徹底融化2×MasterMix,混勻後Minispin将溶液收集到管底。

2. 按照(zhào)下表在0.2ml PCR管中制備反應體(tǐ)系:

 

50μl反應體(tǐ)系

終濃度

2×MasterMix

25μl

上遊引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

下遊引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

模闆

× μl

10pg-1μg

補至50μl

 

3. 快(kuài)甩離(lí)心将反應液收集到管底。

4. PCR儀如(rú)果沒有熱(rè)蓋加熱(rè)的話(huà),補加25μl礦物油。

5. PCR儀上執行以下程序:

步驟

溫度

時間

循環數

初始變性

94

5 min

1

變性

94

30 sec

25-40*

退火(huǒ)

Tm-5*

30 sec

延伸

72

0.5kb/min

最後延伸

72

5 min

1

*注: PCR 反應條件(jiàn)視模闆、引物等的結構條件(jiàn)不同而各異。在實際操作(zuò)中需根據模闆、目的片段的大(dà)小、堿基序列和引物的長短(duǎn)等具體(tǐ)情況,設定最佳的反應條件(jiàn)(溫度、時間等)。

6. 電泳檢測。

 注:使用含染料的2×MasterMix可(kě)以直接上樣;不含染料的2×MasterMix要與6×loading buffer混合後上樣。



1% agarose gel,RealSafe Red stain
lane 1: 1800bp,Rice fragement
lane 2: 1000bp, plasmid fragement
lane 3: 500bp, plasmid fragement


 
隻有購(gòu)買過該商品的用戶才能進行評價。[發表評價]