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2×Long Taq PCR MasterMix 含染料

2×Long Taq PCR MasterMix 含染料

産品編号:RTL3104-03

産品規格:5×500μl

相(xiàng)關規格:
數量
價格 ¥400

2×Long Taq PCR MasterMix

 産品包裝:

 

 

目錄号

包裝

價格

2×Long Taq MasterMix(不含染料)

RTL3103-02

500μl

150

RTL3103-03

5×500μl

600

2×Long Taq MasterMix(含染料)

RTL3104-02

500μl

150

RTL3104-03

5×500μl

600

注:以50μl PCR反應體(tǐ)系爲例,每次使用25μl 2×MasterMix500μl可(kě)做2050μl PCR反應。

 儲存條件(jiàn): -20℃可(kě)長期保存;4℃穩定貯存3個月。經常使用時,一旦融化後請(qǐng)4℃貯存,盡量避免反複凍融。

 産品簡介:

本産品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優化劑以及穩定劑,濃度爲2×。使用時,隻需補加實驗所需的引物和模闆後即可(kě)進行PCR反應,可(kě)最大(dà)限度的減少人(rén)爲誤差,具有快(kuài)速簡便、穩定性好等優點。用于短(duǎn)鏈和長鏈DNA擴增,特别适合于長片段DNA的擴增。使用該産品得(de)到的PCR擴增産物末端含有一個A堿基,可(kě)以直接用于TA克隆。

 質量控制:

經檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘餘基因組DNA;能有效地擴增人(rén)基因組中的單拷貝基因。

●  使用說(shuō)明:

1. 冰浴中徹底融化2×MasterMix,混勻後Minispin将溶液收集到管底。

2. 按照(zhào)下表在0.2ml PCR管中制備反應體(tǐ)系:

 

50μl反應體(tǐ)系

終濃度

2×MasterMix

25μl

上遊引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

下遊引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

模闆

× μl

10pg-1μg

補至50μl

 

3. 快(kuài)甩離(lí)心将反應液收集到管底。

4. PCR儀如(rú)果沒有熱(rè)蓋加熱(rè)的話(huà),補加25μl礦物油。

5. PCR儀上執行以下程序:

三步法:

步驟

溫度

時間

循環數

初始變性

94

1-5 min

1

變性

94

30 sec

25-40*

退火(huǒ)

Tm-5*

30 sec

延伸

72

1 min/kb

最後延伸

72

5 min

1

兩步法:

步驟

溫度

時間

循環數

初始變性

94

1-5 min

1

變性

94

30 sec

25-40*

退火(huǒ)和延伸

68

1 min/kb

最後延伸

72

5 min

1

*注: PCR 反應條件(jiàn)視模闆、引物等的結構條件(jiàn)不同而各異。在實際操作(zuò)中需根據模闆、目的片段的大(dà)小、堿基序列和引物的長短(duǎn)等具體(tǐ)情況,設定最佳的反應條件(jiàn)(溫度、時間等)。

 實驗示例:



 
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