瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒
● 試劑盒内容：
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試劑盒組成
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RTP2201-02 （100次）
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RTP2201-03（200次）
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溶膠液PN
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100 ml
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2×100
ml
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3 M NaAc pH5.2
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500μl
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500μl
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漂洗液PW
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25 ml
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2×25 ml
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洗脫緩沖液EB
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15 ml
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15 ml
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吸附柱CA1
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100個
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2×100個
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收集管（2 ml）
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100個
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2×100個
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說(shuō)明書(shū)
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1份
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1份
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● 儲存條件(jiàn)：
本試劑盒在室溫（15–25℃）幹燥條件(jiàn)下，可(kě)保存12個月；更長時間的保存可(kě)置于2–8℃。（注意：當低溫貯存時，使用前應先将試劑盒内的溶液在室溫中放(fàng)置一段時間，必要時可(kě)在37℃水浴中預熱(rè)10-20分(fēn)鍾，以平衡溶液溫度。）
● 産品簡介：
本試劑盒采用可(kě)以高效、專一結合DNA的矽基質材料和獨特的緩沖液系統，從(cóng)TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時去(qù)除蛋白(bái)質、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離(lí)子及寡核苷酸引物等雜質。可(kě)回收100 bp–40 kb大(dà)小的片段，回收率大(dà)于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率爲30－50 %）。
每個吸附柱每次最多可(kě)吸附的DNA量約爲20
μg。
使用本試劑盒回收的DNA可(kě)适用于各種常規操作(zuò)，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。
● 産品特點：
1 溶膠液PN爲亮黃(huáng)色，便于觀察膠是否徹底融化和溶膠體(tǐ)系的pH是否合适。
2 操作(zuò)快(kuài)捷，單個樣品操作(zuò)少于15分(fēn)鍾。
注意事(shì)項：請(qǐng)務必在使用本試劑盒之前閱讀(dú)此注意事(shì)項。
1 電泳時最好換用新鮮的電泳緩沖液，以免影(yǐng)響電泳和回收效果；如(rú)有可(kě)能，盡量使用TAE系統，因爲有研究指出使用TBE系統後，回收産物中的痕量硼酸會影(yǐng)響後續的酶切反應。
2 切膠時，紫外照(zhào)射時間應盡量短(duǎn)，以免對DNA造成損傷；請(qǐng)盡量去(qù)除不含目的片段的瓊脂糖凝膠，這将會對融膠很有幫助。
3 第一次使用前請(qǐng)按照(zhào)标簽說(shuō)明在漂洗液PW中加入無水乙醇，并做好标記，用完後緊擰瓶蓋。
● 操作(zuò)步驟：
如(rú)非指出，所有離(lí)心步驟均爲使用台式離(lí)心機(jī)在室溫下離(lí)心。
1 将單一的目的DNA條帶從(cóng)瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多餘部分(fēn)）放(fàng)入幹淨的離(lí)心管中，稱取重量。
2 向膠塊中加入3倍體(tǐ)積溶膠液PN （如(rú)果凝膠重爲100mg，其體(tǐ)積可(kě)視爲100 μl，則加入300 μl溶膠液），55℃水浴放(fàng)置10分(fēn)鍾，其間不斷溫和地上下翻轉離(lí)心管，以确保膠塊充分(fēn)溶解。
注意：
① 如(rú)果此時溶膠液變爲粉紅(hóng)色，請(qǐng)加入少量3MNaAc pH5.2（一般說(shuō)來(lái)，10μl足矣），使溶膠液變爲黃(huáng)色再上柱離(lí)心。
② 對于高濃度的凝膠（>2％），按照(zhào)100mg凝膠加入100μl滅菌水和600μl溶膠液PN的比例加入溶膠液PN。
③ 膠塊完全溶解後最好将膠溶液溫度降至室溫再上柱，因爲吸附柱在較高溫度時結合DNA的能力較弱。
3
可(kě)選步驟：當目的片段<500bp時，如(rú)想提高回收效率，向溶膠體(tǐ)系種加入1/3溶膠液PN體(tǐ)積的異丙醇（如(rú)使用300μl溶膠液，則加入100μl異丙醇），混勻，55℃溫浴1分(fēn)鍾後再進行步驟4。當目的片段>500bp時，省略此步驟，直接進行步驟4。
4 将上一步所得(de)溶液加入到吸附柱CA1中（吸附柱放(fàng)入收集管中），室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾，13,000
rpm離(lí)心60秒，倒掉收集管中的廢液，将吸附柱重新放(fàng)入收集管中。
注意：
1 吸附柱CA的有效容積爲700μl，如(rú)溶膠體(tǐ)系體(tǐ)積大(dà)于700μl，分(fēn)次上柱，保證全部溶液都(dōu)加到吸附柱中。
2
<100bp和>10kb的片段請(qǐng)在室溫放(fàng)置10分(fēn)鍾，這将會提高回收效率。
5 向吸附柱中加入700μl漂洗液PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），13,000 rpm離(lí)心60秒，倒掉廢液，将吸附柱重新放(fàng)入收集管中。
6 向吸附柱中加入500μl漂洗液PW，13,000
rpm離(lí)心30-60秒，倒掉廢液。
7 将離(lí)心吸附柱CA1放(fàng)回收集管中，13,000 rpm離(lí)心2分(fēn)鍾，盡量除去(qù)漂洗液。
注意：此步必不可(kě)少！如(rú)果漂洗液有殘留會影(yǐng)響回收效率和DNA質量，進而影(yǐng)響下遊實驗；離(lí)心後将吸附柱蓋子打開，室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾，這樣将有助于徹底揮發殘餘乙醇。
8 将吸附柱放(fàng)到一個幹淨離(lí)心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加适量洗脫緩沖液EB（一般不要少于30μl），室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾。13,000 rpm離(lí)心1分(fēn)鍾收集DNA溶液。
注意：
1可(kě)将洗脫緩沖液EB預熱(rè)到70℃後再加到吸附膜上，這樣可(kě)以提高洗脫效率。
2 CA1柱的洗脫體(tǐ)積不應少于30
μl，體(tǐ)積過小将會降低回收效率。
3洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大(dà)影(yǐng)響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5範圍内，pH值低于7.0會降低洗脫效率
9 DNA産物-20℃保存。
RTP2201 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒發表文章(zhāng)
1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterized
ampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection of
Tilletia controversa Kuhn.
Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Letters in Applied Microbiology 2009,49,235-240
Institution：Institute of
Plant Protection ,Chinese Academy of Agricultural Sciences
Paper link： https://doi.org/10.1111/j.1472-765X.2009.02645.x
2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-alleles
and development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying the S-genotype
in apple cultivars.
Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li
Product: RTP2201瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Tree Genetics & Genomes (2010)
6:161–168
Institution：China
Agricultural University
Paper link： https://link.springer.com/article/10.1007/s11295-009-0237-6
3. [2010 IF=0.921] An ISSR-based Approach for the Molecular
Detection and Diagnosis of Dwarf Bunt of Wheat, Caused by Tilletia controversa
Kuhn.
Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: J Phytopathol 159:155–158 (2011)
Institution：State Key
Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant
Protection, CAAS
Paper link：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1439-0434.2010.01735.x
4. [2010 IF=1.359] Curing the Plasmid pXO2 from Bacillus
anthracis A16 Using Plasmid Incompatibility.
Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao,
Hengliang Wang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Curr Microbiol (2011) 62:703–709
Institution：State Key
Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology
Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s00284-010-9767-2
5. [2010 IF=1.993] Computation-assisted SiteFinding-PCR for
isolating flanking sequence tags in rice
Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, and
Chengcai Chu
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: BioTechniques Vol. 51 | No. 6 | 2011
Institution：Institute of
Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences
Paper link：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22150334/
6. [2013 IF=1.687] Tobacco Arabinogalactan Protein NtEPc Can
Promote Banana (Musa AAA) Somatic Embryogenesis.
Author: H. Shu & L. Xu & Z. Li & J. Li & Z. Jin & S. Chang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Appl Biochem Biotechnol (2014)
174:2818–2826
Institution：Haikou
Experimental Station, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s12010-014-1228-0
7. [2020 IF=1.857] Characterization and Developmental
Expression Patterns of Four Hexamerin Genes in the Bumble Bee, Bombus
terrestris (Hymenoptera: Apidae).
Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8
Institution：Institute of
Apicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences
Paper link：https://doi.org/10.1093/jisesa/ieab078
8. [2022 IF= 1.7] VvAGAMOUS Affect Development of Four
Different Grape Species Ovary.
Author: Pengfei Zhang, Yuqin Zhang1, Qifeng Zhao, Tiequan Niu, Pengfei Wen and
Jinjun Liang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Phyton-International Journal of
Experimental Botany (2023) , vol.92, no.4
Institution：College of
Horticulture, Shanxi Agricultural University
Paper link：https://doi.org/10.32604/phyton.2023.026227