PCR産物純化試劑盒(目錄号:RTP2202)
試劑盒内容及保存:
試劑盒組成
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RTP2202-02
(100次)
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RTP2202-03
(200次)
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貯存方式
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結合液PB
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100 ml
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2×100ml
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室溫
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3 M NaAc pH5.2
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500 μl
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500 μl
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室溫
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漂洗液PW
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25 ml
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2×25
ml
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室溫
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洗脫緩沖液EB
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15 ml
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15 ml
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室溫
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吸附柱CA2
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100個
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2×100個
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室溫
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收集管(2 ml)
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100個
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2×100個
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室溫
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說(shuō)明書(shū)
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1份
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1份
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儲存條件(jiàn):
本試劑盒在室溫(15–25℃)幹燥條件(jiàn)下,可(kě)保存12個月;更長時間的保存可(kě)置于2–8℃。(注意:當低溫貯存時,使用前應先将試劑盒内的溶液在室溫中放(fàng)置一段時間,必要時可(kě)在37℃水浴中預熱(rè)10-20分(fēn)鍾,以平衡溶液溫度。)
産品簡介:
本試劑盒采用離(lí)心吸附柱結合獨特的緩沖液系統,從(cóng)酶切、PCR等反應溶液中純化DNA片段,同時除去(qù)蛋白(bái)質、無機(jī)鹽離(lí)子及寡核苷酸引物等雜質。使用本試劑盒可(kě)回收100bp–10kb的DNA片段,回收率大(dà)于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率爲30-50 %)。
每個吸附柱每次最多可(kě)吸附的DNA量約爲10 μg。
使用本試劑盒回收的DNA可(kě)适用于各種常規操作(zuò),包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。
産品特點:
1 結合液PB爲亮黃(huáng)色,便于觀察體(tǐ)系的pH是否合适。
2 操作(zuò)快(kuài)捷,單個樣品操作(zuò)少于10分(fēn)鍾。
操作(zuò)步驟:
如(rú)非指出,所有離(lí)心步驟均爲使用台式離(lí)心機(jī)在室溫下離(lí)心。
1 在PCR反應液中直接加入5倍體(tǐ)積的PB液,颠倒混勻後,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g離(lí)心30-60秒,到掉收集管中的廢液,将吸附柱CA2重新放(fàng)入收集管中。
注:● 如(rú)果PCR反應體(tǐ)系使用了石蠟油,無需去(qù)除,但(dàn)要使用10倍體(tǐ)積的PB液。
● 如(rú)果反應體(tǐ)系小于50μl,用水補至50μl體(tǐ)系,再加入PB液。
● 如(rú)果體(tǐ)系體(tǐ)積大(dà)于700μl,請(qǐng)分(fēn)次上柱,保證全部溶液均加入到吸附柱中。
2
向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),10,000g離(lí)心30-60秒,倒掉廢液,将吸附柱重新放(fàng)入收集管中。
3
向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10,000g離(lí)心30-60秒,倒掉廢液。
4
将離(lí)心吸附柱CA2放(fàng)回收集管中,10,000g離(lí)心2分(fēn)鍾,盡量除去(qù)漂洗液。
注意:此步必不可(kě)少!如(rú)果漂洗液有殘留,将會影(yǐng)響回收效率和DNA質量,進而影(yǐng)響下遊實驗;離(lí)心後将吸附柱蓋子打開,室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾,這樣将有助于徹底揮發殘餘乙醇。
5 将吸附柱放(fàng)到一個幹淨離(lí)心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加适量洗脫緩沖液EB,室溫放(fàng)置2分(fēn)鍾。10,000g離(lí)心2分(fēn)鍾收集DNA溶液。
注意:
● 可(kě)将洗脫緩沖液EB預熱(rè)到60-70℃後再加到吸附膜上,這樣可(kě)以提高洗脫效率。
● CA2柱的洗脫體(tǐ)積不應少于20
μl,體(tǐ)積過小将會降低回收效率。
● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大(dà)影(yǐng)響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5範圍内,pH值低于7.0會降低洗脫效率
6 DNA産物-20℃保存。
RTP2202 PCR産物純化試劑盒發表文章(zhāng)
1. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in major
histocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance to
infectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss
(Walbaum, 1792).
Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang
Product: RTP2202 PCR産物純化試劑盒
Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/jai.12326
2. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzyme
activity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaena
cambodiana.
Author: Xing-Hong Wang,Changhe Zhang
Product: RTP2202 PCR産物純化試劑盒
Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107
Institution:Yunnan Institute
of Microbiology, Yunnan University
Paper link:https://link.springer.com/article/10.1007/s11033-012-2032-y
3. [2015 IF=1.32] Association between MHC II beta chain gene
polymorphisms and resistance to infectious haematopoietic necrosis virus in
rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792).
Author: Juan Yang, Zhe Liu, Hai-Na Shi, Jiu-Pan Zhang, Jian-Fu Wang, Jin-Qiang
Huang & Yu-Jun Kang
Product: RTP2202 PCR産物純化試劑盒
Journal: Aquaculture Research, 2016, 47,
570–578
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/are.12516