RealCarrier核酸助沉劑

RealCarrier核酸助沉劑是幫助核酸在乙醇中沉澱的一種非動物源性的核酸沉澱專用試劑。乙醇低溫沉澱是回收液體(tǐ)樣品中DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉澱并不能完全回收樣品中的核酸，特别是在回收微量(＜5ng/μl)或者低片段(＜200bp)核酸時，損失更爲嚴重(有數據表明，單獨的乙醇沉澱隻能回收50%的此類DNA和RNA)。RealCarrier核酸助沉劑是一種分(fēn)子生(shēng)物學級的非動物源性的多聚物溶液，在乙醇沉澱時加入4-6 μl RealCarrier核酸助沉劑即可(kě)明顯提高核酸沉澱的得(de)率，可(kě)使痕量DNA(＜5ng/μl)的回收率達到95-98%，同時可(kě)選擇性去(qù)除短(duǎn)引物(<20bp)片段和dNTP。與生(shēng)物源性的核酸沉澱助劑如(rú)糖原（有文獻報道，糖原影(yǐng)響DNA-蛋白(bái)質的相(xiàng)互作(zuò)用）和tRNA相(xiàng)比（tRNA會影(yǐng)響多聚核苷酸激酶對DNA的磷酸化），RealCarrier核酸助沉劑本身(shēn)無核酸污染也無DNA酶和RNA酶活性，同時不影(yǐng)響酶切、連接、轉錄、PCR、轉化轉染等。RealCarrier核酸助沉劑已成爲最常用的核酸助沉劑。

按照(zhào)400 μl核酸樣品使用5 μl RealCarrier核酸助沉劑計(jì)算，該産品可(kě)以至少使用400次。

● 貯存：

4℃貯存。有效期二年(nián)。

● 使用說(shuō)明：

1. 按照(zhào)下表，在1.5ml離(lí)心管中依次加入DNA樣品，0.1倍樣品體(tǐ)積3MNaAc pH5.2，5μl RealCarrier，2.5倍樣品體(tǐ)積無水乙醇，混合均勻；當樣品體(tǐ)積大(dà)于400 μl時，可(kě)按每100 μl加入1μl RealCarrier的比例增加使用量，如(rú)700μl樣品，加8μl RealCarrier。

	不同體(tǐ)積的DNA樣品處理(lǐ)
DNA樣品	100 μl	200 μl	300 μl	400μl
3M NaAC pH5.2	10 μl	20 μl	30 μl	40 μl
RealCarrier	5 μl	5μl	5μl	5μl
無水乙醇	250 μl	500 μl	750 μl	1000 μl

注：a 待回收的核酸樣品濃度要在10 pg/μl至100 ng/μl之間。過高濃度的樣品使用本産品會降低回收效率，高于300 ng/μl的樣品不要使用本産品，可(kě)以直接使用經典的乙醇沉澱方法回收。

b 加入RealCarrier核酸助沉劑後無需低溫孵育，低溫孵育反而會降低回收效率。混勻後請(qǐng)直

接進行離(lí)心步驟。

2. 12000rpm 常溫離(lí)心10分(fēn)鍾。

3. 棄上清，加入1ml 70%乙醇漂洗沉澱；12000rpm 常溫離(lí)心5分(fēn)鍾。

4. 棄上清，快(kuài)甩離(lí)心，用10 μl微量移液器徹底吸棄殘餘乙醇，常溫開蓋幹燥1-2分(fēn)鍾幹燥沉澱。

注：幹燥時間不要過久，過分(fēn)幹燥的核酸樣品不易溶解；幹燥時間也不能過短(duǎn)，殘餘的乙醇會影(yǐng)響核酸樣品的後續操作(zuò)，如(rú)抑制内切酶的活性。

5 沉澱溶解于1×TE或超純水中，-20℃保存。

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