RNAwait使用說(shuō)明
樣品保存液
● 産品編号及規格：
RTR2305 100ml 200元
● 産品簡介：
RNA高效保存液（RNAwait）是一種無毒的可(kě)直接使用的樣品儲存液，能使細胞内的RNA與RNA酶分(fēn)離(lí)，可(kě)以快(kuài)速可(kě)靠地保存動物組織、細胞内的RNA。組織獲取後立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可(kě)以保存7天，4℃可(kě)以保存4周，-20℃、-80℃标本可(kě)以長期保存，RNA穩定存在不降解，取出後用各類方法抽提可(kě)以獲得(de)高質量的RNA。
● 保存條件(jiàn)：
15–25°C，保質期2年(nián)。低溫條件(jiàn)下有結晶析出時加熱(rè)至37°C溶解後使用。
● 操作(zuò)流程：
1．根據要保存的各樣本的體(tǐ)積，計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體(tǐ)積的10倍（100mg組織約用1ml RNAwait）；離(lí)心收集2×107細胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是：量甯多勿少。
建議(yì)在實際操作(zuò)中不要稱量組織，而直接根據目測結果加入RNAwait量，以加快(kuài)操作(zuò)和減少污染。例如(rú)5mm邊長的立方體(tǐ)組織塊，體(tǐ)積爲125mm3=125μl，故應當加入1.25ml的RNAwait液。
2．将RNAwait按需要量分(fēn)裝入自(zì)備保存管中；
3． 快(kuài)速将較大(dà)的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，較小的組織直接取下，立即完全浸入RNAwait中。
注：組織的厚度一定要<0.5
cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護。較大(dà)的組織可(kě)以切成厚度<0.5 cm的任意片狀後保存，較小的組織（如(rú)大(dà)鼠的腎髒、脾髒，小鼠的大(dà)部分(fēn)器官）則可(kě)以直接浸入RNAwait。
4．保存時先将樣本浸入RNAwait後置4℃冰箱過夜（注：4℃過夜是必需的，這樣可(kě)使RNAwait完全滲入到組織中），然後轉移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃時可(kě)能爲液态，也可(kě)能爲固态，如(rú)有結晶析出，也是正常情況）；或者在4℃冰箱過夜後，直接轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反複凍融至室溫20次不影(yǐng)響RNA的質量。
● 注意事(shì)項：
1. 組織和細胞取材速度要快(kuài)，在獲取後應當盡快(kuài)浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰凍組織不能用RNAwait保存，因爲RNAwait不能有效滲入冰凍組織。
3．保存樣品的RNA提取：樣本從(cóng)-20℃或-80℃冰箱取出後，複溫到室溫後，取出組織塊，再用于提取RNA。細胞樣本則複溫後低速離(lí)心收集細胞，去(qù)除RNAwait，再用于提取RNA。後繼的處理(lǐ)（如(rú)組織勻漿）可(kě)以在室溫下進行，不必在液氮中操作(zuò)，RNA仍能有效得(de)到保護。殘留少量RNAwait保存液不影(yǐng)響後繼提取RNA的質量。
4. RNAwait在動物組織（如(rú)大(dà)鼠肝髒，脾髒）和細胞（如(rú)DH5α）RNA的保護中效果不錯；植物材料種類繁多，沒能一一測試(煙草和拟南(nán)芥葉片中的RNA能被RNAwait有效保護)，建議(yì)預實驗後再使用，