單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒
産品編号
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規格
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運輸
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RTS5103
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20次
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常溫
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● 産品簡介
單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒(ssDNA PAGE Stain Kit for Nucleic Acids)是一種快(kuài)速簡單、可(kě)用于尿素-聚丙烯酰胺凝膠中的核酸檢測的試劑盒。采用新型染色劑,電泳結束後可(kě)以直接染色凝膠,不用借助任何成像儀器,既能觀察核酸條帶。該方法能檢測到下限10ng的 ssDNA條帶,常用于檢測 SSR 标記、SNP 标記等。
按照(zhào)每次使用50 ml染色液計(jì)算,本試劑盒可(kě)用于18-20塊常規的8×10cm凝膠的染色。
● 産品組成:
産品編号
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産品名稱
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規格
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貯存
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RTS5103-1
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染色貯存液(10×)
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100 ml
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常溫
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RTS5103-2
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染色緩沖液(5×)
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250 ml
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常溫
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-
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125ml棕色塑料瓶(空)
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-
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● 儲存條件(jiàn)
常溫保存;常溫運輸,開封後一年(nián)有效。
● 使用方法:
一. 即用型染色液配制:
在125 ml棕色塑料瓶中依次加入以下組份,混勻;即用型染色液常溫貯存。
順序
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組份
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50 ml
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1
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染色貯存液(10×)
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5
ml
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2
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超純水
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35
ml
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3
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染色緩沖液(5×)
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10
ml
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二. 染色步驟:
1. ssDNA PAGE電泳後,凝膠用蒸餾水漂洗1-2次。
2. 加入适量即用型染色液覆蓋凝膠,一般8×10cm凝膠50 ml即可(kě),在搖床上常溫搖動15-20分(fēn)鍾,搖動速度爲60-70rpm。一般2-5分(fēn)鍾可(kě)以看(kàn)到條帶。
三. 脫色步驟:
倒掉染色液,加入适量蒸餾水,在搖床上常溫搖動15-20分(fēn)鍾,期間可(kě)以更換2-3次蒸餾水;至凝膠背景透明後記錄圖片。
注:1. 染色時間不要太長,更不能過夜染色。長時間染色會導緻ssDNA遊離(lí)出凝膠,導緻膠上無帶。
2. 使用後的染色液收集後,可(kě)以重複使用2-3次
● 實驗示例:
● 常見(jiàn)問(wèn)題:
1.
背景太深:
a. 顯色時間過長。通常凝膠在染色液裡(lǐ)2-5分(fēn)鍾既能看(kàn)到條帶,顯色反應會在20分(fēn)鍾内結束,顯色反應時間過長會藍色背景很深。
2. 核酸條帶非常淺:
a. 上樣量太少。 該染色方法可(kě)以檢測到10
ng 單鏈DNA片段,請(qǐng)控制核酸上樣量。
3. 染色方法适合于雙鏈DNA染色嗎(ma)?
不适合。雙鏈DNA的分(fēn)離(lí)一般用非變性DNA PAGE電泳,該染色液不能有效染色。