植物凝膠(Phytagel)
●産品簡介:
Phytagel又名Gellan gum,Gelrite。是一種瓊脂的替代物,是細菌(假單孢菌Pseudomonas elodea)經過發酵生(shēng)産的,含有葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等物質,具有無色、透亮和高韌性的特點,是配制植物組織培養基和微生(shēng)物培養基的主要成分(fēn)。由于其克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷爲植物學研究帶來(lái)了一場新的革命,已經成爲了國(guó)際公認的植物組培首選産品。
●常用工(gōng)作(zuò)濃度:
植物培養基中1.5-2.5g/L;微生(shēng)物培養基中10g/L。
●優點:
1. 高透明度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少:A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進生(shēng)長:It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意事(shì)項:
1. 植物凝膠不易溶解于冷(lěng)水中,滅菌前請(qǐng)搖勻。
2. 植物凝膠的凝固程度主要與三個因素有關:
a 離(lí)子強度:Phytagel的凝固需要陽離(lí)子尤其是二價陽離(lí)子的存在。一般植物培養基中的鈣離(lí)子和鎂離(lí)子的濃度足以讓phytagel凝固。微生(shēng)物學研究所用的低鹽培養基中爲了使Phytagel凝固,通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或使用高濃度的Phytagel。
b 培養基的pH值:pH5.8是其凝固的最适pH值,pH低于5.8不易凝固。由于高壓滅菌會使培養基的pH降低0.3-0.5單位,因此滅菌前培養基的pH值要用MES和KOH調節到pH5.8,由于MES的緩沖能力,滅菌後不會使pH降低。建議(yì)MES 1升培養基中加0.5克(終濃度爲2.5 mM)
注:培養基中加入植物凝膠後,用KOH調節pH到5.8。避免先調節pH後加植物凝膠,因爲植物凝膠會影(yǐng)響培養基的pH。
c 凝膠用量:一般說(shuō)來(lái),對大(dà)多數植物培養基來(lái)說(shuō),1升培養基中凝膠用量3g(0.3%)足矣。特殊要求請(qǐng)适當調整凝膠用量。
附錄:植物凝膠與瓊脂使用對比
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[Ca2+]
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[Mg2+]
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Phytagel
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Agar
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pH
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MS培養基
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2.99mM
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1.50mM
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0.3%
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1%
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5.8
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1/2 MS培養基
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1.495mM
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0.75mM
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0.6%
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1%
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5.8
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細菌培養
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-
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-
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1%
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1.5%
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-
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Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.