5×TBE
5×Tris-Borate-EDTA Solution
産品編号
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産品名稱
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規格
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TB001
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5×TBE
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500 ml
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品名:5×TBE
簡介:
TBE 即 Tris-Borate-EDTA buffer ,5×TBE是 5 倍濃縮的 TBE,使用時需用蒸餾水稀釋 5 倍後再使用,1×TBE工(gōng)作(zuò)液中組份濃度:89 mM Tris-borate,2 mM EDTA,pH8.0。
TAE與TBE的區别:
1. TAE更适合于跑大(dà)片段,大(dà)于13 kb的片斷用TAE分(fēn)離(lí)效果好。TBE更适合于跑小片段,低于1 kb片段TBE效果更好。
2. TAE緩沖能力弱,需要經常更換,長時間電泳不可(kě)以選用。TBE有更強的緩沖能力,然而5×或10×TBE貯存容易出現沉澱。
3. 凝膠回收的話(huà)用TAE會更好,有文獻指出TBE中的硼酸影(yǐng)響回收效率,并且對回收後續連接反應有抑制作(zuò)用。
保存及效期:
RT保存。有效期1年(nián)。
緩沖液TAE與TBE,哪個更好?
TAE和TBE緩沖液都(dōu)可(kě)以用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳,兩者各有利弊,應根據實際情況選擇不同的緩沖液。
1×TAE 成分(fēn):40 mmol/L
Tris-乙酸;2 mmol/L EDTA。實驗室一般配成50×TAE。
優點:超螺旋在其中電泳時更符合實際相(xiàng)對分(fēn)子質量,質量電泳大(dà)于13 kb 的片段時分(fēn)離(lí)效果好,可(kě)用于回收DNA片段。貯存液可(kě)以配成50×的高濃度,方便使用。
缺點:緩沖容量小,緩沖能力弱,長時間電泳(如(rú)過夜)不可(kě)選用。
1×TBE成分(fēn):45 mmol/L
Tris-硼酸;1 mmol/L EDTA。實驗室一般配成5×或10×TBE。
優點:緩沖能力強,适合較長時間電泳,分(fēn)辨率較高,電泳小于1kb的片段時分(fēn)離(lí)效果好。
缺點:緩沖液中的硼酸成分(fēn)會影(yǐng)響 DNA 回收效率以及後續的酶反應實驗;貯存液容易沉澱析出。
1. 電導率TBE>TAE。因此相(xiàng)比于TAE,TBE不太會導緻電泳槽内過熱(rè)的情況發生(shēng),長時間電泳推薦使用TBE
2. 硼酸是酶的抑制劑,因此如(rú)果你(nǐ)需要分(fēn)離(lí)電泳的DNA用于酶切反應,建議(yì)使用TAE作(zuò)爲電泳緩沖溶液
3. TBE對于較小片段的分(fēn)離(lí)效果更好。對于小于300bp的片段,在2%的瓊脂糖凝膠上,TBE中的遷移速度更快(kuài)
4. TAE适用于大(dà)片段的分(fēn)離(lí),大(dà)于2kb的片段在TAE中的遷移速度更快(kuài)(0.8%的瓊脂糖凝膠中),速度比在TBE中快(kuài)出約10%。當片段大(dà)于13kb時,一般推薦使用TAE進行電泳分(fēn)離(lí)。
5. TAE更适用于回收DNA片段
6. 相(xiàng)比于TBE,TAE對于超螺旋的DNA分(fēn)辨率更高