台盼藍染色液（Trypan Blue Staining Solution）

●     産品組成：

● 産品簡介：

台盼藍（Trypan Blue)或稱台盼蘭、錐蟲藍，是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率，是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結構完整，能夠排斥台盼藍，細胞不會被染成藍色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可(kě)被台盼藍染成藍色。台盼藍可(kě)被巨噬細胞吞噬，故可(kě)用于巨噬細胞的活體(tǐ)染色劑。凋亡小體(tǐ)也有台盼藍拒染現象，因此台盼藍溶液不能區分(fēn)凋亡細胞和死亡細胞。台盼藍染色後，通過顯微鏡下直接計(jì)數或顯微鏡下拍(pāi)照(zhào)後計(jì)數，就(jiù)可(kě)以對細胞存活率進行比較精确的定量。染色時間隻需 3-5 分(fēn)鍾，操作(zuò)簡單。

● 貯存：

4℃保存，一年(nián)有效。

● 操作(zuò)步驟：

1.收集細胞：

對于貼壁細胞先用胰酶消化液消化細胞，用适量細胞重懸液（Hank’s液或生(shēng)理(lǐ)鹽水）重懸細胞；對于懸浮細胞，1000-2000g離(lí)心1分(fēn)鍾收集細胞，棄上清，用适量細胞重懸液重懸細胞。

2.台盼藍染色：

吸取100微升重懸的細胞到1.5 ml離(lí)心管内，加入100微升台盼藍染色液，輕輕混勻，染色3分(fēn)鍾  (染色3分(fēn)鍾時間已經足夠，但(dàn)染色時間可(kě)以更長一些，但(dàn)不宜超過10分(fēn)鍾)。

3.計(jì)數：

  吸取少量經過染色的細胞，用血細胞計(jì)數闆計(jì)數。通常如(rú)果要比較精确地進行定量，每個細胞樣品至少數500個細胞，數出藍色細胞和細胞總數。

細胞存活率＝(細胞總數－藍色細胞數)/細胞總數×100%

● 注意事(shì)項：

1. 染色時間不能太長，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顔色，使檢測結果偏低。

2. 爲了您的安全和健康，請(qǐng)穿實驗服并戴一次性手套操作(zuò)。

實驗示例：

Jurkat細胞台盼藍染色結果，深藍色細胞爲死細胞