1×SDS-PAGE快(kuài)速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)
● 産品組成:
貨号
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名稱
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規格
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TG190P
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1×SDS-PAGE快(kuài)速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)
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10×1L
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 産品簡介:
本産品爲即用型SDS-PAGE快(kuài)速電泳緩沖液(Fast
Running Buffer for SDS-PAGE),由Tris-Glycine電泳緩沖液優化而來(lái),适用于Tris-Glycine體(tǐ)系(Laemmli體(tǐ)系)蛋白(bái)凝膠電泳。與傳統的Tris-Glycine電泳緩沖液相(xiàng)比,使用本産品電泳時無需根據分(fēn)離(lí)膠和濃縮膠調整不同電壓,可(kě)全程200-250 V恒壓電泳,約20-35 min可(kě)完成電泳,大(dà)大(dà)節約時間,并且對小分(fēn)子蛋白(bái)分(fēn)離(lí)效果更好,可(kě)使預染蛋白(bái)Marker中10
kD與15 kD條帶分(fēn)離(lí)并清晰可(kě)見(jiàn)(凝膠濃度8%以上),達到快(kuài)速高效分(fēn)離(lí)蛋白(bái)的作(zuò)用。
本産品爲預混粉末,使用前需要用水配制溶解,但(dàn)無需調節pH值,pH
8.0-8.5。
● 貯存和效期:
常溫貯存,常溫運輸,有效期2年(nián);配成溶液後,4℃貯存,有效期1-2周。
● 用前必讀(dú):
1. 和傳統的SDS-PAGE電泳液(Laemmli系統,1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1%
SDS,pH8.3)相(xiàng)比,本快(kuài)速電泳液可(kě)以大(dà)幅加快(kuài)電泳速度,縮短(duǎn)電泳時間。推薦150-200V恒壓電泳,通常20-35分(fēn)鍾就(jiù)能完成電泳。
2.
使用快(kuài)速電泳緩沖液單闆膠電泳時,穩壓200
V,起始電流在60-70 mA,如(rú)果同時電泳2闆膠或者4闆膠,電流會升高,請(qǐng)根據需求采取降溫措施。
3. 對于低濃度例如(rú)6%、8%或10%的固定濃度膠,本快(kuài)速電泳液比傳統電泳液具有更好的分(fēn)離(lí)效果,可(kě)以達到類似梯度膠的分(fēn)離(lí)效果,更适合小分(fēn)子量蛋白(bái)電泳。産生(shēng)相(xiàng)同分(fēn)離(lí)效果時,使用本快(kuài)速電泳液可(kě)使用濃度更低的分(fēn)離(lí)膠,例如(rú)使用傳統電泳液對10%、12%或15%分(fēn)離(lí)膠進行電泳時,使用本快(kuài)速電泳液時對應的分(fēn)離(lí)膠隻需要分(fēn)别爲6%、8%和10%,電泳效果基本一緻。并且由于膠濃度較低,可(kě)以增強轉膜效率,提高WB檢測靈敏度。
不同蛋白(bái)大(dà)小選擇不同的分(fēn)離(lí)膠濃度,參考下表:
Laemmli系統
SDS-PAGE分(fēn)離(lí)膠濃度
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最佳分(fēn)離(lí)範圍(kD)
1×SDS-PAGE快(kuài)速電泳緩沖液
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最佳分(fēn)離(lí)範圍(kD)
1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液
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6%
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25-300
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50-350
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8%
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10-250
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35-300
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10%
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5-150
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20-150
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12%
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3-100
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15-100
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15%
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低于60
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10-80
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4. 本快(kuài)速電泳液含有SDS,适用于變性膠蛋白(bái)電泳,不适用于非變性電泳(Native-PAGE)。
5.
該快(kuài)速電泳緩沖液建議(yì)用于經典Laemmli系統配制的凝膠,經測試可(kě)以達到最優的分(fēn)離(lí)效果。對于其他(tā)電泳系統如(rú)Bis-Tris系統,HEPES系統,Tris-醋酸系統,Tricine系統等,需要經過驗證測試後使用。
6. 本快(kuài)速電泳液可(kě)以适當回收,回收後的電泳液可(kě)以作(zuò)爲外槽電泳液再使用1-2次。如(rú)果希望獲得(de)最佳的電泳效果,請(qǐng)勿使用回收的電泳液。内槽緩沖液每次都(dōu)需要使用新鮮配制的電泳緩沖液。
● 使用說(shuō)明:
1. 即用型1×SDS-PAGE快(kuài)速電泳緩沖液配制:
取1 L包裝的SDS-PAGE快(kuài)速電泳液(粉末裝),倒入到燒杯中,加入超純水至總體(tǐ)積約爲900 ml,漩渦攪拌溶解,定容到1 L并混勻,即配成即用型1×SDS-PAGE快(kuài)速電泳液,溶液型緩沖液建議(yì)4℃貯存,可(kě)保存1-2周。
注:配制好的電泳液放(fàng)置時間不宜超過兩周。如(rú)果出現變色或沉澱請(qǐng)重新配制新鮮的電泳液。
2. 電泳條件(jiàn):
電壓建議(yì)爲150-200V。一般情況下,恒壓200 V電泳時,對于濃度爲10%的分(fēn)離(lí)膠僅需20-25分(fēn)鍾即可(kě)完成電泳。如(rú)果需獲得(de)更加平整和銳利的條帶,可(kě)以把電壓調整爲100-150V,此時電泳時間需要适當延長。
● 實驗示例: