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Real Taq DNA聚合酶

Real Taq DNA聚合酶

産品編号:RTC3102-03

産品規格:5×500U

相(xiàng)關規格:
數量
價格 ¥360

Real Taq DNA Polymerase

● 儲存條件(jiàn):-20 保存

● 濃    : 5 U/ml

産品簡介

Real Taq DNA Polymerase是從(cóng)克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大(dà)腸杆菌經誘導表達後分(fēn)離(lí)純化的,其分(fēn)子量爲94 KD具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,無3’-5’外切酶活性。在PCR反應中,Real Taq DNA Polymerase延伸速度爲1-2 kb/分(fēn)鍾,産物3’端帶A,可(kě)直接用TA載體(tǐ)克隆。

活性定義

1單位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定義爲在7430分(fēn)鍾内,以活性化的大(dà)馬哈魚精子DNA作(zuò)爲模闆/引物,将10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

10×Taq Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分(fēn)。

适用範圍

一般用于DNA片段的PCR擴增、DNA标記、引物延伸、序列測定、平末端加A等,産物可(kě)以直接用于T/A載體(tǐ)克隆。

反應舉例:

注意:以下舉例爲常規PCR反應系統,僅供參考。實際反應條件(jiàn)因模闆、引物等的結構不同而各異,需根據模闆、目的片段的大(dà)小、堿基序列和引物長短(duǎn)等具體(tǐ)情況,設定最佳反應條件(jiàn)。

以人(rén)基因組DNA爲模闆,擴增1 kb的片段

1. 反應體(tǐ)系的建立:50 ml反應體(tǐ)系如(rú)下(可(kě)根據比例放(fàng)大(dà)或縮小反應體(tǐ)系)

 

Template

<1mg

Primer 110 mM

1 ml

Primer 210 mM

1 ml

10×Taq Buffer

5 ml

dNTP Mixture(10 mM)

1 ml

Taq (5 U/ml)

0.5 ml

ddH2O

補至 50 ml

2.  PCR反應循環的設置:

94 3 min

94 30 sec

55 30 sec      30 cycles

72 1 min

72 5 min

3.  結果檢測:反應結束後取5 ml反應産物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。


 
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